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小鼠(FK)elisa实验要求,趋化因子

142 人阅读发布时间:2021-05-13 10:38

小鼠(FK)elisa实验要求,趋化因子切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(1:3 1:5)(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。 注:PBS  没有严格规定多少量   做成1:3   或 1:5 的组织匀浆就可以了,可用生理盐水代替量做成1:3就可以了
植物标本的采集及保存 
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积3倍的提取液(10% TCA), 置于-20  过夜;
3、 请于4 ,8000rpm,离心1小时,弃上清,收集沉淀;
4、 沉淀加入等体积的冰浴B酮,混匀后于4  离心(8000rpm,15分钟),弃上清并真空干燥,保存备用;
5、 上样前加入裂解液(2.7g 尿素,0.2g CHAPS,溶于去离子水中至终体积5ml),混匀后室温放置30分钟,然后4  离心(8000rpm,15分钟),取上清并暂时保存于4  待用。
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